流式细胞仪使用简介

wolf

1什么是流式细胞仪
      流式细胞仪（Flow cytometer ）是对细胞进行自动分析和分选的装置。它可以快速测量、存贮、显示悬浮在液体中的分散细胞的一系列重要的生物物理、生物化学方面的特征参量，并可以根据预选的参量范围把指定的细胞亚群从中分选出来。
      流式细胞仪可以针对1个细胞的多项特征(细胞的大小、标记的荧光等)同时进行检测。



2原理· 操作



3滤光片的选择
例如要检测Fluoresceine(荧光素)时







4检测与分析方法


01单染分析   例) ROS Assay Kit



02双染分析  例) Annexin V, 633 Apoptosis Detection Kit



1注意事项
检测的激发光强度过高的话可能会造成荧光泄露。荧光泄露发生时无法得到正确的检测结果。





2解决方法
可通过PI和FITC的单染色的方法来确认是否有荧光泄露


图中②的PI检测的激发光强度降低后再检测，③的实验条件保持和①一样的条件
5应用领域
1细胞周期



G2/M期 细胞的DNA的量是G0/G1期 的2倍。
DNA染料染色的G2/M期荧光强度是G0/G1期的荧光强度的2倍
利用这一原理进行细胞周期的检测。



[C543]Cell Cycle Assay Kit - PI/RNase Staining
[C548] Cell Cycle Assay Solution Deep Red
[C549] Cell Cycle Assay Solution Blue
2细胞凋亡





[AD10] Annexin V, FITC Apoptosis Detection Kit
[AD11] Annexin V, 633 Apoptosis Detection Kit

3
分析染料





[MD01] Mitophagy Detection Kit
[MT13] MT-1 MitoMP Detection Kit
[R252]ROS Assay Kit -Highly Sensitive DCFH-DA-

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