「探究细胞病理技术中的固定液选择与应用」

虎威将军

细胞技术常用的固定液
        (一)95%乙醇
       95%乙醇是最常用的细胞学快速固定液。乙醇是一种脱水剂，当其取代细胞中的水分时，可使蛋白质凝固，引起细胞的收缩，在染色后可以看到清晰的细胞核结构、染色质的形态特征。乙醇能沉淀白蛋白、球蛋白和核蛋白，但核蛋白沉淀后能溶于水，所以，经95%乙醇固定的涂片在染色前不必经过水洗。此固定液适用于HE染色和巴氏染色，在细胞细节表现上略差于甲醇。固定时间根据样本的不同，时间也不尽相同，穿刺涂片固定时间为1~5min；胸腔积液、腹腔积液、尿液等液体涂片固定15~30min；痰涂片固定30~60min。
        (二)甲醇
       甲醇固定时间快，细胞收缩小，细胞核保存较好，结构清晰，染色鲜艳，常作为液基细胞特别是穿刺细胞涂片的固定液。经甲醇固定的涂片，染色前也不必经过水洗，该固定方法适用于HE染色和巴氏染色。固定时间根据样本的不同，时间也不尽相同，穿刺涂片固定时间为1~5min；胸腔积液、腹腔积液、尿液等液体涂片固定15~30min；痰涂片固定30~60min。
        (三)冰乙酸醇固定液
        虽然冰乙酸不能沉淀白蛋白，但能沉淀核蛋白，渗透性强，固定快，常与其他溶液混合使用。如果在97ml95%的乙醇(或甲醇)中加3ml冰乙酸，不仅可以有效破坏部分红细胞，还具有减少细胞收缩和脱片的功能。同时，对黏液较多的样本也有一定的去除效果。
        (四)无水乙醇
        对糖原保存较好，容易使细胞收缩，很少单独使用，一般只用于需要做糖原染色的涂片的固定。
        (五)Carnoy固定液
        Carnoy液能固定细胞质和细胞核，尤其适宜于染色体的固定。其常用于糖原及尼氏体的固定，由于冰乙酸能溶解红细胞并可防止细胞由乙醇引起的过度收缩，对固定有血的样本和显示DNA、RNA效果较好。经 Carnoy 液固定后，固定液内有大量的红细胞碎片及脱落的细胞，必须及时过滤或更新，否则容易造成污染。
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