实验菜鸟选择ELISA试剂盒的正确步骤

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ELISA试剂盒以灵敏度较高、特异性较好的特点在上得到了广泛的应用，然而实验新手们面对各种各样、动则上上千种的ELISA试剂盒，内心应该是崩溃的。
各种厂家、品牌，各种种属，各种因子，琳琅满目，质量良莠不齐，如何浪里淘金，选择既符合研究需求，又品质上乘的 ELISA 试剂盒呢?
学霸姐姐教你几招，一眼“相中”最可靠、最合适的那个ELISA试剂盒!



首先，你要明确研究种属：
一般来说，厂家都会在产品名称上标明种属，且为首个单词，检索种属的常用语言为英文。
如果您需对不同物种的同一因子进行定量，建议优先寻找适用于多个种属的 ELISA 试剂盒，产品介绍中会注明「Multi-species」。
其次，要明确样本类型：
不同厂家验证样本类型不同，即使同一厂家不同试剂盒，其验证样本类型也不尽相同。特别是复杂的血浆样本，根据样本处理方式的差异，分为 EDTA 血浆、肝素抗凝血浆和柠檬酸盐血浆，因此购买前需仔细核对。
第三步：要会预测自己的目标因子的浓度
一般来说，待测因子可以根据经验或资料获得参考的检测范围，且正常人与疾病状态存在差异。如热门炎症因子 IL-6，正常人血清中浓度为 3.13 pg/mL，病人会显著增高，CAR-T 回输病人血清中的 IL-6 浓度甚至为正常人的 200 倍以上。
因而，必要时进行样本的稀释及选择合适检测范围的试剂盒极其重要。
若浓度太低，可选择高敏试剂盒;若不确定待测浓度或样本间浓度差异较大，建议使用检测动态范围更宽的化学发光法ELISA试剂盒。
如同样为 IL-6 ELISA 试剂盒，各类型检测范围差异较大，需要根据实际情况选择合适的试剂盒。
第四步：检查试剂盒进行过哪些质控
质控数据在说明书中即可找到，在购买前检查试剂盒是否进行过严格的质控实验，包括批次内(Intra-Assay)及批次间(Inter-Assay)、掺入回收实验、线性稀释实验及交叉反应测试等，每个数据最好都看一下，确保超强的结果重现性及准确性。
第五步：确定需检测的因子数量
如果待测因子超过 5 个，且样本量较小时，单因子 ELISA 检测方法并不是最佳选择。
建议考虑多因子检测方法，如固相芯片(样本数量一般 5 个以内，检测指标可达上百个)及 Luminex 液相芯片方法 (检测样本多达 80 个，检测指标多达 50 个)或微流控 ELISA 检测系统 Ella。
可节约样本及时间成本，也可保证检测结果准确。
第六步：预算评估
预算往往是大家优先考虑的，实际上，不能够一味讲究产品价格，更需要考虑性价比。生物学是极其严谨的科学，一致性的实验结果是基金、文章等评审过程中必不可少的因素，即使低廉的价格，不能够完美重现结果，也是资源的另一种浪费。
怎么样，你学会了没？



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