在实验室里面怎么把病毒养活？

HaHa

经常看到有关于讨论在实验室里怎么把病毒养活的经验，我想问是什么意思，是把死亡的病毒在养活吗？如果没有死为什么还要养活呢？难道把半死不活的病毒养活吗？

原文地址：https://www.zhihu.com/question/665063064

队长是我

题主想问的应该是“病毒拯救”而不是“养活病毒”。可能是偶然听到过生物相关的讨论。如果不是也没关系，两者大差不差。
养活≈扩增。
生物实验室分离毒株是个挺常见的课题。分离出某病毒的毒株后，查阅文献+自己尝试各种此病毒的易感细胞，批量养了细胞以后进行接毒就可以进行扩增病毒。病毒大量扩增以后就可以把病毒液离心冻存了。
病毒拯救就是人为设计某种表达目的蛋白的病毒，经过质粒转染获得重组病毒后，进行扩增使其获得扩增能力的过程就是拯救。常用于病毒载体疫苗、假病毒疫苗实验。
常见的毒性极低几乎等于没有的两种病毒载体，一是腺相关载体（AAV），一是杆状病毒载体。但是由于杆状病毒侵染的细胞为昆虫细胞，所以一般仅作为蛋白表达系统。而腺相关载体可以直接表达病原病毒的抗原蛋白在表面，作为直接的活病毒疫苗来使用。



某猪病S1蛋白的AAV载体疫苗293T细胞荧光



荧光与明场双通道叠加

然后进行病毒拯救。
制备293T细胞悬液密度为10的5次方个cell每ml，按照100ul每孔接种至96孔板，待细胞贴壁后加入rAAV；取10ul病毒原液，按10倍进行梯度稀释，取10稀释后的rAAV加入96孔板中；4h后，更换为新鲜培养液并添加丁酸钠；24h后，观察荧光表达情况，在最高稀释梯度的孔中计算绿色荧光细胞数目。

大力水手

有些办法的。一种是体外培养，看养哪种病毒，就给哪种宿主细胞，比如噬菌体可以用细菌养，针对某个部位的病毒就用那个部位的细胞养。一种是体内培养，就是直接把病毒给到宿主活体里面，然后可以通过各种内在外在指标观察，或者做实验。

队长是我

在实验室研究病毒时，通常是指在培养基或细胞培养物中培养病毒，培养病毒要利用细胞培养技术。病毒是一种需要寄生在宿主细胞内才能进行复制的微生物，因此需要提供合适的环境来维持病毒的生存和繁殖。

"养活"病毒并不是指让已经死亡的病毒复活，而是指提供适当的条件让病毒在实验室环境下继续活跃、增殖或进行研究。并没有半死不活的病毒一说，病毒不是复杂的生物细胞，它本身并没有生命，只有当它侵入到宿主细胞内才能进行复制。

通过在实验室中培养病毒，可以研究病毒的生命周期、复制机理、病原性以及对抗病毒的药物等，这对于疾病的治疗和预防具有重要意义。