什么是侧流免疫层析测定（lateral flow test，LFT）？

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简介

侧流免疫层析测定是一种基于抗原、抗体免疫反应的经典快速检测技术。这种技术最常见的产品是验孕棒：标有检测线T线(Test Line)和控制线C线(Control Line)。如果检测线与控制线都有颜色，则表示怀孕。



验孕棒

免疫层析测定常见的英文名称有：

• Lateral flow test (LFT)
  
• Lateral flow assay (LFA)
  
• Lateral flow immunoassay (LFIA)
  

国内又之为胶体金技术。新冠自测试剂盒也是采用此技术路径。



新冠自测试剂盒

主要内部结构

• 硝酸纤维素膜（nitrocellulose membrane）：起导流作用，检测样本由毛细作用会从左往右流动。
  
• 结合垫（Conjugate Pad）：检测样本与胶体金标记的抗体进行混合。如果检测样本中有目标抗原，标记的抗体会与抗原结合，形成标记的抗原。注意：结合垫是通过胶体金标记的抗体来对抗原进行标记。
  
• 检测线（Test Line）：固定有目标抗原的抗体，检测有无目标抗原。
  
• 控制线（Control Line）：检测胶体金是否有效。
  

胶体金的内部结构

运行原理

检测样本（血液，尿液等）先滴入样品垫（Sample Pad），进行第一阶段的处理，比如过滤。由于毛细作用，样本会流向结合垫（Conjugate Pad）。结合垫含有荧光（胶体金等）标记过的目标抗原的抗体。如果样本中含有目标抗原，标记过的抗体会与目标抗原结合。

目标抗原与标记的抗体结合
https://www.zhihu.com/video/1626284351381053440
样本经过结合垫后，会继续沿装置移动，流向硝酸纤维素膜上的检测线(Test Line)。与胶体金标记抗体结合的抗原会与检测线上固化的抗体结合，将形成一条彩色线，线的密度将取决于目标物质的数量。 注意：检测线上固化的抗原叫一抗，捕捉目标抗原。

样本经过检测线
https://www.zhihu.com/video/1626309566181621760
经过检测线后样本流入控制线(Control Line)。样本中的标记的抗体与控制线固化的抗体结合，将形成一条彩色线。如果没有这个彩色带，说明产品已经失效。注意：控制线上固化的抗原叫二抗，捕捉胶体金标记的抗体。

样本经过控制线
https://www.zhihu.com/video/1626310675340513281
如果样本中没有目标抗原，则结合垫上不会形成胶体金标记过的抗原，所以检测线上固化的抗体无法捕捉标记的抗原而不显色，但控制线上的抗体会结合标记的抗体而显色。

检测为阴性的过程
https://www.zhihu.com/video/1626314970106363904

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