免疫层析试纸检测

营养师

• 概念
  抗原抗体反应与膜层析相结合的检测技术，常用胶体金作标记物。
  
• 结构
  

免疫层析试纸

• 原理
  
• 双抗夹心法多用于有多个抗原结合位点的大分子检测，阻断法多用于仅有1个抗原结合位点的小分子检测。检测试纸质量主要取决于抗原和抗体性质。
  
• 夹心法在T线处包被待检测物的A抗体，样品流经T线且含有待检测物时，待检测物被A抗体固定，使得与待检测物结合的胶体金标记B抗体同样沉积而显色。
  
• 阻断法在T线处包被待检测物，样品流经T线且含有待检测物时，其中流动的待检测物与T线处固定的待检测物竞争结合胶体金标记抗体，使得胶体金标记抗体无法沉积而不能显色。
  
• C线处固定的针对胶体金标记抗体的抗体，C线是质控线，若无显色则表明检测试纸有问题，结果无效，需要更换试纸重新检测。
  

检测原理

• 结果分析
  
• C线（Control）不出现，表示检测无效。C线出现表明检测有效，通过观察T线（Test）来判断样品是否含有待检测物，T线出现在夹心法中表示阳性，与阻断法相反。
  

结果分析

• 补充 ：
  
• 胶体金是由氯金酸(HAuCl4)在还原剂如白磷、抗坏血酸、枸橼酸钠、鞣酸等作用下，可聚合成一定大小的金颗粒，由于静电作用而形成带负电的疏水胶溶液，称胶体金。
  
• 胶体金标记，实质上是带正电荷基团的蛋白质等大分子被吸附到带负电荷的胶体金颗粒表面的包被过程。由于这种结合是静电结合，所以不影响蛋白质的生物特性。
  
• 免疫金标记技术(Immunogold labelling technique) 主要利用了金颗粒具有高电子密度的特性，在金标蛋白结合处，在显微镜下可见黑褐色颗粒，当这些标记物在相应的配体处大量聚集时，肉眼可见红色或粉红色斑点，因而用于定性或半定量的快速免疫检测方法中，这一反应也可以通过银颗粒的沉积被放大，称之为免疫金银染色。
  

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