一文盘点化学发光中的化学发光剂

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来源：知乎
什么是化学发光剂？

在化学发光反应中参与能量转移并最终以发射光子的形式释放能量的化合物，称为
化学发光剂或发光底物。
能作为化学发光剂的条件：
1.发光的量子产率高；
2.它的物理-化学特性要与被标记或测定的 物质相匹配；
3.能与抗原或抗体形成稳定的偶联结合物；
4.其化学发光常是氧化反应的结果；
5.在所使用的浓度范围内对生物体没有毒性。
化学发光剂可分为直接化学发光剂和酶促反应化学发光剂
一.直接化学发光剂
直接化学发光剂在发光免疫分析过程中不需要酶的催化作用，直接参与发光反应，它们在化学结构上有产生发光的特有基团，可直接标记抗原或抗体。
这种标记物的化学反应简单、快速、无须催化剂，且标记效率高，成本低。
一般常用的化学发光物质主要是通过启动发光试剂NaOH+H2O2作用而发光，其发光非常迅速。其中小分子物质的检测多采用竞争法，大分子物质的检测主要用夹心法。
1. 吖啶酯
在碱性条件下被H2O2氧化 时,发出波长为470nm的光，具有很高的发光效率，其激发态产物 N-甲基吖啶酮是该发光反应体系的发光体。


2.三联吡啶钌
不同于直接化学免疫发光免疫分析和酶促化学发光免疫分析，电化学发光免疫分析（ECLIA）是以电化学发光剂三联吡啶钌（［Rb（bpy）3］2＋）标记抗原或抗体，以三丙胺（tripropylamine，TPA）为电子供体，在电场中因电子转移而发生特异性化学发光反应，它包括电化学和化学发光两个过程。
三联吡啶钌 [RU(bpy)3]2+是 电化学发光剂，它和电子供体三丙胺（TPA） 在阳电极表面可同时失去一个电子而发生氧化 反应。





电化学发光剂反应原理

二. 酶促反应发光剂：
是利用标记酶的催化作用，使发光剂(底物）发光，这一类需酶催化后发光的发光剂称为酶促反应发光剂。
目前常用的标记酶有碱性磷酸酶（ALP）和辣根过氧化物酶（HRP）。
1.鲁米诺及其衍生物



鲁米诺发光原理

2.AMPPD
〔3-(2‘-螺旋金刚烷)-4-甲氧基-4-(3“-磷酰氧基)苯-1,2-二氧杂环丁烷〕〕
ALP和1,2-二氧环己烷衍生物（AMPPD）构成的发光体系是目前较灵敏的化学发光体系，其特点是反应速度快，在很短时间内提供可靠的结果。AMPPD的分子结构中有两个重要部分，一个是联接苯环和金刚烷的二氧四节环，它可以断裂并发射光子；另一个是磷酸根基团，它维持着整个分子结构的稳定。



AMPPD反应原理

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